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      毛細管電泳儀的操作莫大意,要注意這些細節

      更新時間:2021-01-21瀏覽:1107次

         毛細管電泳儀的操作莫大意,要注意這些細節

        毛細管電泳儀是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅動力的新型液相分析技術,是分析科學中繼液相色譜之后的又一重大進展,它使分析科學得以從微升水平進入納升水平,并使單細胞乃至單分子分析成為可能,使長期困擾我們的生物大分子如蛋白質的分離分析也因此有了新的思路。該儀器可用于對有機化合物、無機離子、中性分子、手性化合物、蛋白質和多肽、DNA和核酸片段的分析。廣泛應用于環境保護、生物化學、醫學衛生、臨床檢測、司法、食品衛生、藥品檢測、農業化學等領域。
        分析原理:
        檢測原理基于被測組分和背景電解質的吸光度不同,當被測組分通過檢測窗時,吸光度發生的變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實驗條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。
       

      毛細管電泳儀

        毛細管電泳儀對進樣技術要求很高,進樣操作事項如下:
        1、進樣區帶越小越好:
        無論采用何種進樣方式,毛細管插入樣品溶液的深度一般要少于毛細管總長度的1%~2%,以盡量減少樣品溶液經毛細吸附進入毛細管而影響進樣量的性。樣品管中溶液少為5μL,進樣體積為1~50nL。
        2、進樣時間以短為宜:
        通常進樣時間為0.5~1s,此時毛細管粘附的樣品量相對于吸入的體積可忽略不計。雖然進樣時間可至±0.1s,但由于毛細管插入樣品管時不可避免地會粘附一些溶液,進樣時間過短會影響分析的重復性。
        3、樣品預濃縮:
        受毛細管內總體積的制約,對于濃度很稀的樣品,不能像HPLC那樣可加大進樣量來提高檢測靈敏度,但可采取一些措施來改善。
        4、毛細管插入樣品溶液后,應立即開始進樣操作,完成后迅速移至緩沖液中開始電泳。否則會產生毛細作用和虹吸現象,引起誤差并使譜帶展寬。
        5、電極不要和毛細管接觸,樣品貯器和緩沖液貯器液面的高度應保持平衡。
        6、使毛細管電泳儀盡可能保持恒溫。因溫度直接影響粘度,而影響進樣量的恒定。

       

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